蛋白质组学

G蛋白偶联受体定位错位

大家好。
最近在做建一个高表达某G蛋白偶联受体的CHO细胞株,载体是pEGFP-C1。
稳定筛选后,细胞的荧光表达很好。
但奇怪的问题是,该受体定位出现了问题。原本该定位在膜的G蛋白偶联受体,现在基本上呈全细胞分布,而且核尤其亮。百思不得其解。
请各位战友指点。
附图为该细胞的Confocal图,没有染核。
多谢大家啦!

会不会是该受体带上了EGFP后无法定位到膜上了。

谢谢楼上。
初步考虑是这个问题。可还是很奇怪。
这个错误的蛋白为什么细胞没有发现,还奇怪的进入了核?
那这个细胞还能继续做功能实验吗?
比如G蛋白偶联受体激动剂造成的钙内流实验?

如果不是定位到膜上,应该无法继续做功能实验了。

请问下楼上,难道细胞膜上一点点定位正确的都没有吗?

如果该受体的流式抗体,倒是可以用流式检测的方法确定细胞膜上是否表达有该受体。

好的,多谢楼上:)

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