蛋白质组学

水貂阿留申病对流免疫电泳

材料与试剂

1、抗原 人工感染急性阿留申病貂组织提纯抗原。

2、标准阳性血清和阴性血清,供试验对照。

3、待测血清

4、琼脂糖

5、0.05Mol/L pH8.6巴比妥缓冲液

6、玻璃板 10cm×4.5cm。

7、打孔器 孔径3mm。

8、微量加样器 100µl。

操作方法

1、制琼脂糖板 1%琼脂糖,10ml铺于10×4.5cm的玻板上,厚度约3mm。

2、打孔 孔径3mm,孔距8mm。

3、加样 待检血清加入阳极孔,抗原加入阴极孔,每孔10μl。同时设标准阳性和标准阴性血清对照。

4、电泳 抗原孔置阴极端。双层滤纸搭桥,电压90V~100V,电泳时间30min~60min。

结果测定:在对照组成立的情况下,在抗原和待测血清之间形成一条清晰灰白色沉淀线,稍偏向血清孔,为阳性。

注意事项

1、抗原必须低温(-25℃)保存。4℃保存一周。

2、电泳必须用纯度较高的琼脂糖,缓冲液pH8.6,电压不超过100V,否则影响检查效果。

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