蛋白质组学

组织化学与免疫组织化学染色的组织标本取材

组织化学与免疫组织化学染色的组织标本取材
 
      在组织细胞材料准备过程中,要求尽可能保持生活状态下组织细胞形态结构的完整性,  尽量保持其化学成分和酶的活性,更要保持组织细胞的抗原性不受损。如果抗原性被破坏  或组织坏死自溶,被检物质已经丢失,即使用高超的技术也很难检出,而且往往由于组织的  坏死或制片时的刀痕挤压,出现假阳性结果。取材应尽可能迅速,所用的刀应锐利,不可反  复切拉组织.以免造成组织的挤压。标本离体后应立即用固定剂进行固定,或立即速冻进行冷冻切片,或保存于一80℃冰箱备用。组织块大小要适中,一般为2.5cm× 2.5cm× 0.2cm,切记取材时组织块宁可面积大,不能厚的原则,保证固定液快速渗透到组织内部,使组织蛋白迅速凝固,从而完好地保存被检物质和组织细胞形态。对于病理标本,取材部位应包括主要病变区和病灶与正常组织交界区,必要时取远离病灶区的正常组织作对照。
 
    动物取材时应先将动物麻醉再处死,其方法如下:
 
    1.乙醚吸入麻醉法  将动物放入有浸透乙醚棉花的玻璃缸内.盖上盖子,待动物麻醉后再取材。该法常用于大白鼠和豚鼠的取材,但易引起内脏淤血。
 
    2.戊巴比妥钠和乌拉坦麻醉法  对较大的动物如兔、猫、狗和猴,乙醚吸人麻醉效果不好,一般用3%戊巴比妥钠水溶液或用20%乌拉坦,腹腔或静脉注射进行麻醉,注射剂量约为1~2m1/kg。麻醉后再放血,以免内脏淤血。
 
    3.空气栓塞法  用注射器回抽空气于管内,将空气注入动物静脉内,可立即使动物死亡,但因此法使血液内产生空气栓塞,致使血管和内脏易产生淤血,故应尽快切断主动脉放血,再行取材。


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