蛋白质组学

三维空间内务向同性的概念及各向同性切片的制作

三维空间内务向同性的概念及各向同性切片的制作
 
    为正确地得到特征物在三维空间内长度和表面积等,必需对其做方向性随机抽样。如果特征物在三维空间内各个方向均匀分布,即具有各向同性,如肾小体的毛细血管球,可通过组织作任意方向切片,然后在切片上进行二维研究,通过所得二维数据推断特征物的三维结构信息。如果特征物在三维空间内呈各向不同性分布,则需通过组织制作各向同性切片,并在其中获取数据。制作各向同性切片的方法有定向法(orientator)和球切法(isector)。
 
    球切法:采用有圆形小腔的塑料模具,将组织块放人小腔内包埋,使包埋介质(如树脂)充满小腔,包埋介质变硬后形成球形包埋块。把球形包埋块取出,在平面上任意滚动,然后对组织块按常规电镜包埋方法包埋。“球切法”原理颇为简单,利用球面的各向同性特征,在平面上任意滚动球形包埋块,相当于用“盲法”随机确定球面上一个均匀随机点,由此确定空间内一个均匀随机方向。但是,“球切法”需要专门包埋模具,而且仅适用于体积较小的组织块。
 
球切法模具图
图左侧显示一个特殊制作的模具,模具上的数字指示其深处有球形的腔。图中部显示一个弯曲的模具,可见球形腔的盖子已被切开,标本放人球形腔内。然后用包埋介质充填小腔。包埋介质变硬以后,包埋的标本则形成球形。在最上方的腔内在一个球形的包埋标本。图右侧显示球形包埋标本的放大图像


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