蛋白质组学

大脑研究抽样过程

大脑研究抽样过程
 
    随机选择一侧大脑半球,将其包埋于6%琼脂中,切取等距离脑组织切片,切片厚度为7mm,共切取20张切片。我们确定从一侧大脑半球抽取5块大脑白质进行研究,首先,将从20张脑组织切片中抽取5片,即每4张等距切片中抽取一张(每隔3张抽取一张)。从前4个数字当中随机选择一个,这个数字则作为第一张脑片的抽取位置,假设选择3,则第3张脑片作为第一个脑组织块抽取的位置,然后每隔3张脑片抽取一片,即3,7,11,15,19号脑片。由于脑片较大,还需在所得脑片上再次抽取组织块。在所得脑片上随机叠放等距有孔测试点,这些测试点排列均匀,在测试点其中白质的部位取组织块。可使大脑白质每个部位有均等的机会被抽取。
大脑半球连续等距随机抽样示意图
一侧大脑半球连续切片共20张。每片7mm。共抽取5张。则每4张抽取一张。第一张切片在1~4之间的随机数字中产生.如果为3,应抽取的组织切片为3,7,11,15,19
大脑白质随机抽样圈
在随机抽取的脑组织块上随机叠放一张具有等距离孔的塑料胶片。因为塑料胶片上的孔击中大脑白质的概率是随机的。所以.当孔击中大脑自质.便在该处抽取一个组织块 
   实际应用中,可自己设计抽取观察组织块的多少。对于一些体积较大的器官,可采取分层等距随机抽样方式。比如先将器官切成等距的组织厚片,从中等距随机抽取组织厚片。如果研究对象是肝脏组织,不难发现,除非所用的测试点非常稀疏,否则,很难见到一个组织片上只击中一个点,而且这样也不符合体视学抽样原则,所以,可将击中部位组织块切取后按顺序排列,再进行第二次等距随机抽样。
    样本含量取决于抽样误差的大小以及待测结构量的变异情况。一般情况下,选择5~10个动物为一组,从每个动物器官取3~10个组织块(切片)。在均匀随机抽样及适当抽样间距的前提下,从每个器官获得的各项基本测试数据,如位于待测结构切面内的测点总数、交点总数、轮廓总数、粒子总数或直径个数等,一般不必超过100~200则可获得满意的测试结果。由此可见,体视学研究可以被理解为一步步等距随机抽样的过程。
 

多次等距随机抽样图
在切取大组织器官时所得到组织片较大,这样用有孔测点取下的小组织块便不只一块,如果样本量太大,则可以将所有样本排列在一起:再次进行等距随机抽样
多次连续等距随机抽样图
图中显示如何从器官随机棺取组织片的过程,即从器官随机抽取组织片,从组织片随机抽取组织块,从绢织块随机切取一张组织切片,再从这张组织切片上随机抽取视野。第一个视野的位置随机选择,然后视野在X轴和Y轴方向每次以同等距离(dx、dy)移动。体视学分析测试系统的计算机可按抽样设计控制视野移动距离

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