蛋白质组学

R&D Systems 蛋白芯片技术专辑

当您在研究用药物、细胞因子、抑制剂、病毒等作用细胞后细胞因子、信号通路(磷酸化)分子、免疫受体分子、细胞凋亡分子、干细胞标记分子、血管生成标记分子、肥胖症标记分子相关等蛋白分子表达变化的高通量初步筛选与定量检测时,面对大规模的WB实验,您是否烦躁了呢?面对表达量很低的蛋白,转膜造成的蛋白的丢失,您是否困惑啦?有一种方法可以解决上面的问题。它不需要特殊仪器,6小时最多能检测59种蛋白分子。它比WB的灵敏度高100倍左右;是WB方法和Elisa方法的融合,更有创新,比这两种方法更简单。它就是R&D Systems公司生产的蛋白芯片。

一、R&D Systems蛋白芯片特点简介

作为一种快速、灵敏而又经济的工具,蛋白芯片能同时检测单个样品中多种分析物的相对水平。蛋白芯片的使用不需要任何特殊的仪器,也取代了多次免疫沉淀/ Western blot实验。经多项研究证实,蛋白芯片能简化鉴定蛋白所需的筛选过程。通过监控蛋白水平和一些蛋白翻译后修饰的变化,能迅速靶定目标分子,以便进一步的研究。
R&D Systems蛋白芯片可以测量单一样本中多种蛋白,是一种快捷、敏感、且经济实惠的检测方法。蛋白芯片试剂盒里有缓冲液、检测抗体、和带有捕获抗体的膜,这些捕获抗体经过精心选择,有高度特异性,它们在硝酸纤维素膜上重复点样两次。经多项研究证实,蛋白芯片能简化鉴定蛋白所需的筛选过程。通过监控蛋白水平和一些蛋白翻译后修饰的变化,能迅速靶定目标分子,以便进一步的研究。

二、R&D Systems蛋白芯片及其原理试验操作步骤简单介绍

以“检测人的特定位点42种受体酪氨酸激酶(RTKs)的相对磷酸化水平”的Proteome Profiler Phospho-RTK Antibody Array(货号:ARY001)为例,介绍其原理和操作步骤。其实就相当于多个Western blot集中在一张膜上。高度特异的捕获抗体点样在NC膜上(STEP 1)。捕获抗体识别磷酸化和非磷酸化受体酪氨酸激酶(RTK)的胞外结构域,随后HRP结合的anti-Phospho-Tyrosine抗体特异检测磷酸化的RTK(STEP 2)。之后,利用化学发光检测试剂来检测蛋白,产生的信号与结合的分析物呈正比。

 

(0)

热评文章

发表评论