蛋白质组学

急问,在线等,装有大肠杆菌冻菌的离心管可以从-80拿出再用来离心吗?

同样的菌液,用来提蛋白的。因为摇床问题,今天先摇了一半,离心后-80度冻存。另一半正在摇,准备明天离心冻存的。但是发现明天没有离心瓶了。由于是冻菌,不方便借别人的离心瓶。
我是想可不可以将现在冻着菌的瓶子拿出来离,反正菌是一样的。但是我介意的是离心是4度,菌液冻存后从-80到4度,又累积了新的菌后又存-80,这样可以吗?

紧急提问啊,在线等,谢谢!

如果是哺乳动物肯定很多细胞死掉了.大肠也许坚强一些.

在4度下,是很难升温的,细胞经历了长时间的冰冻过程,必然死掉一些,有些时候,死掉的细胞会释放出来些蛋白酶,你可以加点抑制剂.

不过,最好按照操作步骤一步步来,别心急.增加了不确定性.

如果是用来提取重组蛋白,而且蛋白足够稳定时,应该影响不大的。反复冻融也是破细菌壁的一种方法。当然稳妥一点就像dnazyme版主所说的了。

最好不要这样操作,因为你最好保证的你的细菌是在一个对数生长期的状态,这样才能保证提取你的蛋白,所以最好还是先复苏摇菌16小时再提取蛋白

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